医疗器械环氧乙烷灭菌残留量-气相色谱-顶空进样器-检测操作方法

医疗器械环氧乙烷灭菌残留量-气相色谱法--顶空进样器-检测操作规程

环氧乙烷(EO)为一种 简单的环醚。低温时为无色 易流动液体，沸点10.4℃， 在该温度以上为无色气体。 EO液体在室温下易挥发，有 醚味。 环氧乙烷的综述 ? ? EO具有顽强的扩散和穿透能力，对 芽孢、和病毒等各种微生物均有灭杀 作用，属于广谱灭菌剂。 环氧乙烷的综述 ? 环氧乙烷对人体的危害 (1)急、慢性毒性 (2)三致作用 (3)急性中毒与局部刺激 (4)神经系统损害与慢性毒性 (5)生殖毒性 医疗器械环氧乙烷的接触量限度 前24小时(mg) 前30天(mg) 一生(g) 短期接触 EO: ≤4 / / ECH: ≤ 9 / / 长期接触 EO: ≤ 4 ≤ 60 / ECH: ≤ 9 ≤ 60 / 持久接触 EO: ≤ 4 ≤ 60 ≤ 2.5 ECH: ≤ 9 ≤ 60 ≤ 10 参照标准:ISO10993-7:2008 环氧乙烷残留量分析方法.

气相色谱方法，可用弱极性毛细管柱，顶空方法，用水溶解样品和对照品，对照溶液可用2种方法配制，法1：在冰箱中打入水容量瓶中，用增量法定量，具体方法见10版药典，明胶空心胶囊方法，法2，用电位滴定测定环氧乙烷对照溶液，具体方法见10版中国药典二部，吐温80，聚山梨酯中方法。 

1. 目的

连同生物试验一起，证明经环氧乙烷灭菌的医疗器械产品是否可用。

2. 适用范围

适合经环氧乙烷灭菌的产品经解析后的环氧乙烷残留量检测。

3. 检测依据

GB/T 16886.7-2001医疗器械生物学评价 第七部分

ISO 10993.7-2008 EO灭菌残留量

4. 使用仪器

仪器名称 型号 备注

气相色谱仪 GC2020 FID检测器

氮氢空一体机 深圳三利 

毛细色谱柱 TM-624 0.5um*30m 

水浴锅 / 

顶空进样瓶 20mL 

硅胶封口垫  聚四氟乙烯膜

一次性注射器 1mL 

分析天平 / 精度0.1mg

容量瓶 50mL/100mL 

4. 操作过程

4.1 样品处理：

将样品透析包装打开，选取易于拆卸、剪取及不易于环氧乙烷解析处的部位，将样品剪成5mm长碎块，取1.0g样品1份，放入20mL顶空进样瓶，加纯水5mL，密封，放入恒温60℃±1℃水浴中浸提40min。

4.2 抽样频次

       从每个灭菌批次的产品中随机抽样。一般情况下，每个灭菌批次随机抽样数量为5只。

4.3 环氧乙烷标准贮备液的制备

       取外部干燥的50 mL容量瓶，加水20～30 mL，加瓶塞，称重，到0.1mg。用注射器注入约0.1mL环氧乙烷，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶塞，称重，前后两次称重之差，即为溶液中所含环氧乙烷的重量。计算出贮备液浓度，4℃以下保存备用。

4.4 标准工作液制备

各取1mL贮备液分别配制1×10-3g/L、2×10-3g/L、4×10-3g/L、6×10-3g/L、8×10-3g/L、1×10-2g/L六个系列浓度的标准溶液。密封，备用。各取5mL按4.1方法处理。

5. 气相色谱仪操作

5.1 将氮氢空一体机打开电源，将右侧氮气放气阀打开至少30min，闭合使氮气和氢气气压恢复至0.4MPa。

5.2 将气体净化阀打开。

5.3 打开气相色谱仪电源和工作站软件，待气压和流速平衡后，按点火按钮，观察基线变化及FID检测口是否产生蒸汽。

5.4 参数设定

参数 毛细柱

温度 汽化器

温度 FID检测器

温度 解析时间 进样量

设定值 50℃ 140℃ 140℃ 12h 0.5uL

5.5 将样品与实验用标准品放置于60℃±1℃水浴中，平衡至少40min。

5.6 用玻璃注射器从平衡后的标准品和样品中迅速抽取1mL上部气体，插入毛细管柱进样口，进样，然后点击操作面板上的“确定”按键（进样时应注意进样速度，防止气体逸散及回退）。

5.7 选择标准品图谱，校正标准曲线。将样品图谱代入标准曲线（X：EO浓度，g/L；Y：峰高或面积），根据样品与纯水稀释比例为1：5，计算出样品中环氧乙烷残留量。

5.8 结果计算

WEO = [浸提液体积×（EO出峰面积-125.1）/194.34]/浸提样品的重量

6. 结果判定

       依据GB/T16886.7—2001 医疗器械环氧乙烷灭菌残留量标准，短期接触器械环氧乙烷残留量应≤10ppm。

7. 注意事项

7.1 气相色谱仪中FID检测器关火时应先关闭氢气通路，然后关闭空气通路。

7.2 气相色谱仪在关机前，应将进样口、柱温箱和FID检测器温度降至室温或低于50℃才可关机。

7.3 制备样品的分析人员进行的所有工作，包括化学试剂的使用，应在通风橱内进行，并穿戴防护衣。使用化学药品之前应阅读材料安全方面的说明。

7.4 在一个分析中尽量同一人操作，并使用同一只1mL玻璃注射器，注射器预先恒温到样品相同温度。

7.5 每次注意环氧乙烷保留时间的变化，以防进样气化垫漏气。

7.6 每个样品（包括标样）在尽可能短的时间内分析三次，三次分析中必须有两次结果相差≤5%，否则样品应重新进行分析。